Questões de Biologia Molecular em Biomedicina (Biomedicina - Análises Clínicas)

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Em um laboratório de biologia, assinale a alternativa CORRETA quanto ao procedimento mais indicado para monitorar diariamente a contaminação cruzada em reações de RT-PCR:

  • A medir a absorbância a 260 nm dos tampões isentos de amostra.
  • B registrar apenas a temperatura de retenção do bloco de aquecimento.
  • C inserir um controle não-template em cada placa de amplificação.
  • D quantificar o DNA genômico por fluorometria antes do ciclo de desnaturação.

Durante a investigação de um surto de diarreia em uma creche na cidade de São Paulo, pesquisadores identificaram, em amostras fecais, a presença de cepas de Escherichia coli enteropatogênicas (EPEC) portadoras do gene eae, por meio de reação em cadeia da polimerase (PCR). Esse gene codifica a proteína Intimina, um fator de virulência essencial para a adesão da bactéria às células intestinais do hospedeiro.

Com base na situação apresentada e considerando a classificação de biomarcadores proposta pelo Food and Drug Administration (FDA) e pelo National Institutes of Health (NIH), é correto afirmar que o gene eae, quando detectado diretamente em amostras clínicas, é corretamente classificado como biomarcador

  • A diagnóstico, pois indica a presença do patógeno e permite a confirmação da infecção.
  • B diagnóstico, pois é utilizado para prever a gravidade dos sintomas em infecções causadas por E. coli.
  • C de suscetibilidade/risco, pois indica a predisposição dos indivíduos à infecção por E. coli, independentemente de apresentarem sintomas.
  • D de predição, pois avalia a resposta do organismo à infecção por E. coli.
  • E de monitoramento, pois é utilizado para acompanhar a progressão da infecção intestinal ao longo do tratamento.

A análise de respostas imunes induzidas por vacinas de mRNA, como a BNT162b2, revela que elas compartilham similaridades com vacinas de vírus atenuados, como a de febre amarela, na ativação de vias de interferon, mas se diferem na dinâmica de ativação celular, com ênfase em monócitos inflamatórios. Qual abordagem é mais adequada para confirmar a reprodutibilidade das respostas transcricionais e da memória vacinal induzidas por vacinas de mRNA em comparação com vacinas de vírus atenuados?

  • A Realizar ensaios de ELISA para quantificar níveis de anticorpos totais em uma única amostragem pós- -vacinação, sem análise temporal.
  • B Conduzir ensaios de metabolômica para identificar biomarcadores de eficácia vacinal em fluidos corporais, sem análise de genes.
  • C Aplicar citometria de fluxo para quantificar apenas células T CD8+ em amostras coletadas um mês após a vacinação.
  • D Utilizar transcriptômica (RNA-seq) para comparar perfis de expressão gênica em múltiplos pontos temporais após a administração de ambas as vacinas.
  • E Avaliar a produção de citocinas específicas por qPCR em uma única célula dendrítica isolada após a primeira dose de cada vacina.

O desenvolvimento de um teste diagnóstico baseado em biomarcadores exige a análise de diversos parâmetros para garantir a confiabilidade, a reprodutibilidade e a aplicabilidade do ensaio.

Assinale a alternativa que descreve de maneira mais completa os fatores técnicos essenciais para garantir o desempenho e a precisão do teste diagnóstico.

  • A A estabilidade do biomarcador e a facilidade de coleta do material biológico são suficientes para validar um teste diagnóstico.
  • B Limite de detecção, sensibilidade, especificidade, tipo de material biológico e condições de armazenamento são parâmetros fundamentais para a validação do teste.
  • C A variabilidade genética da população-alvo e a especificidade do teste são os únicos fatores relevantes para a validação.
  • D A automatização do método e o custo do ensaio garantem a qualidade e a precisão do teste diagnóstico.
  • E A escolha da tecnologia utilizada é o principal determinante da acurácia do teste, independentemente do tipo e das condições do material biológico coletado.

Um experimento de vacinologia de sistemas utilizou single-cell RNA sequencing (scRNA-Seq) para caracterizar a heterogeneidade de respostas celulares a uma vacina inativada. Qual é a principal vantagem metodológica dessa técnica em comparação com a RNA-Seq convencional?

  • A Permite a purificação de antígenos diretamente a partir de células imunes.
  • B Elimina a necessidade de normalização estatística dos dados.
  • C Reduz o custo de sequenciamento ao eliminar a necessidade de bibliotecas de cDNA.
  • D Detecta apenas genes associados à imunidade inata, simplificando a análise.
  • E Identifica variações na expressão gênica em nível de células individuais, revelando subpopulações celulares.