Prova da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Biólogo - VUNESP (2024) - Questões Comentadas

Biologia Moléculas, células e tecidos | Transcrição e Tradução

Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Biólogo - VUNESP (2024)

A utilização de isopropanol na extração de DNA/RNA é comumente usada para

A aumentar a solubilidade do DNA/RNA.
B facilitar a lise celular e a liberação de ácidos nucleicos.
C precipitar DNA/RNA.
D degradar contaminantes proteicos.
E ajustar o pH da solução de extração.

Biologia Moléculas, células e tecidos | Transcrição e Tradução

Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Biólogo - VUNESP (2024)

No protocolo de extração de DNA, a adição de EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético) é essencial para

A aumentar a solubilidade do DNA em solução.
B inibir atividades de nucleases que degradam o DNA.
C precipitar o DNA da solução aquosa.
D promover a lise celular e liberar o DNA.
E remover proteínas contaminantes do DNA.

Biologia Moléculas, células e tecidos | Transcrição e Tradução

Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Biólogo - VUNESP (2024)

O reagente de TRIzol é frequentemente utilizado para extração de DNA, RNA e proteínas a partir de amostras de células ou tecidos.

É correto afirmar que o reagente TRIzol é um método que

A é desvantajoso para extração de DNA e RNA de amostras biológicas enriquecidas com RNases endógenas.
B utiliza uma solução monofásica de fenol e isotiocianato de guanidina na qual promove a separação do DNA, RNA e proteínas por precipitação.
C causa separação em duas fases, uma fase orgânica que contém o DNA e RNA, e uma fase aquosa na qual pode ser obtida a fração proteica.
D causa separação de fases após adição de clorofórmio; o RNA é obtido na fase aquosa, o DNA na interface, e as proteínas permanecem na fase orgânica.
E pela adição de álcool isoamílico promove a precipitação das proteínas e separação da interface na qual o DNA e RNA são obtidos.

Biologia Moléculas, células e tecidos | Transcrição e Tradução

Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Biólogo - VUNESP (2024)

Considerando métodos para extração e purificação de ácidos nucleicos, assinale a alternativa correta.

A Beads magnéticas revestidas com material que se liga ao RNA ou DNA são usadas para purificação fácil e com alta pureza, entretanto, o custo é relativamente alto e necessita de equipamento específico.
B A escolha do método de extração independe do tipo de amostra, da quantidade de DNA ou RNA obtida para ensaios subsequentes, pois são métodos padronizados e que apresentam igual eficácia.
C O método de extração com fenol-clorofórmio é amplamente usado em muitos laboratórios devido sua eficácia, porém, apresentam alto custo quando comparados com outros métodos de extração.
D Os métodos que utilizam kits comerciais baseados em colunas de sílica são simples e rápidos, porém, apresentam alto teor de contaminantes, após eluição dos ácidos nucleicos com tampão de baixa salinidade.
E Colunas de gel filtração de fase reversa são ideais para a extração de DNA e RNA de amostras biológicas, pois apresentam alto grau de purificação, rendimento e baixo custo comparativamente aos demais métodos.

Biologia Moléculas, células e tecidos | Transcrição e Tradução

Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Biólogo - VUNESP (2024)

A quantificação precisa de DNA e RNA é essencial em biologia molecular, genética, biotecnologia e diagnóstico clínico. Existem vários métodos para quantificar ácidos nucleicos, cada um com suas vantagens, desvantagens e aplicações específicas.

Com relação aos métodos de análise e quantificação de ácidos nucleicos, assinale a alternativa correta.

A A determinação da concentração precisa de ácidos nucleicos pode ser realizada pela absorção de luz em determinada faixa de comprimento de onda, geralmente 260 nm para proteína e 280 nm para DNA e RNA.
B O equipamento Nanodrop é um espectrofotômetro desenvolvido para determinar a concentração de DNA fita dupla, a partir de pequenas quantidades de solução 1 a 2 μL, porém não detecta DNA fita simples ou RNA.
C Quando a razão da absorbância 260/280 nm de uma solução de DNA obtida no Nanodrop estiver abaixo de 1,8 indica contaminação da amostra com proteínas ou outros contaminantes que absorvem próximo de 280 nm.
D Os fluorômetros como Qubit detectam corantes fluorescentes ligados especificamente à molécula de DNA dupla fita em quantidades extremamente pequenas, mas não servem para quantificar RNA ou proteínas.
E A eletroforese em gel representa um método de análise quantitativa de DNA e RNA, sendo a quantidade precisa de ácido nucleico estimada comparando com a intensidade de bandas com padrões conhecidos